同位素相對標記與**定量技術（iTRAQ技術）

簡介：

? ? ? ?iTRAQ技術（同位素相對標記與**定量技術）是 近年來**開發的一種新的蛋白質組學定量研究技術。iTRAQ試劑盒包括八種同量的胺活性試劑，能對蛋白質水解的肽段進行標記，因此采用串聯質譜方法，可以對肽段進行**的鑒別和定量。能夠得到：一般 500 至 600 種蛋白，以及不同樣品間蛋白質表達的差異。?

應用：

? 同時標記 8 個樣品，一次實驗實現多達 8 個樣品的蛋白質鑒定和定量

? 非常高的通量

? 可以進行多個時間點蛋白質組動態變化的監測，

? 可以分析詳細分期／型的臨床疾病樣本，并可設計樣本重復

? 甚至可以進行個體樣本的研究

? 細胞周期、細胞信號傳導整個過程的蛋白質組動態學

技術特點和優勢

? 定量敏感、反應速度快

? 標記完全，標記效率高達 97%以上

? 較高的重復性，能簡化譜的復雜程度、提高離子強度

? 可對多達八種不同樣本同時進行定量分析

? 定性與定量同時進行

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實驗大致流程：

? ? ? ?操作時首先是對不同蛋白質樣品分別進行酶解，并采用不同的標記對酶解片段進行標記后混合，結合多維色譜分離和后續的串聯質譜鑒定，從而實現對不同 來源樣品蛋白進行分離和鑒定的目的，我們可以提供 8 重標記 iTRAQ 標記，可 以對多達 8 種不同樣本同時進行定量分析。

原理：

? ? ? iTRAQ 試劑包含八種不同的胺活性試劑。每種胺活性試劑與水解后肽段結 合。胺活性試劑包含報告基團和平衡基團。

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