液相色譜—質譜(GC—MS)聯(lián)用檢測方法

質譜法是通過制備、分離、檢測離子來鑒定化合物的一種專門技術，質譜法在一次分析中可提供豐富的結構信息，靈敏度極高。因此，常與氣相色譜儀和液相色譜儀等分析儀器聯(lián)用，大大提高了檢測速率和檢測結果的準確性。

一般來說，在300℃左右能汽化的樣品，主要采用氣相色譜—質譜（GC-MS）聯(lián)用儀進行分析，因為GC-MS使用EI源，得到的質譜信息多，毛細管柱的分離效果也好；如果在300℃左右不能汽化的生物大分子化合物，則需要用液相色譜—質譜（LC-MS）分析。

????液相色譜—質譜(LC—MS)聯(lián)用技術是近年來發(fā)展而成的一種**檢測分析方法。液相色譜儀和質譜儀連接檢測采用了大氣壓電離（API）技術，其中電離源有兩種，分別是大氣壓電噴霧電離源（ESI）和大氣壓化學電離源（APCI）。

????電噴霧(ESI)的工作原理是：電噴霧電離(ESI)是在液滴變成蒸汽，產生離子發(fā)射的過程中形成的，溶劑由液相泵輸送到ESI?Probe，經其內的不銹鋼毛細管流出，這時給毛細管加2－4kv的高壓，由于高壓和霧化氣的作用，流動相從毛細管頂端流出時，會形成扇狀噴霧，使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠。

????大氣壓化學電離?(APCI)工作原理是：APCI電離是在大氣壓條件下利用**高壓（電暈）放電促使溶劑和其他反應物電離、碰撞，及電荷轉移等方式，形成一個反應氣等離子區(qū)，樣品分子通過等離子區(qū)時，發(fā)生質子轉移，形成了(M＋H)?或(M-H)離子或加和離子。

????那么，ESI與?APCI在使用過程中有何不同呢？

????（1）原理上：APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化，即樣品先形成霧，然后電暈放電針對其放電，在高壓電弧中，樣品被電離，然后去溶劑化形成離子，**檢測；ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化，即樣品先帶電再噴霧，帶電液滴在去溶劑化過程中形成樣品離子，從而被檢測。

????（2）適用范圍：APCI?使用于中等極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性；而ESI?易形成多電荷離子，因而可測大分子，主要使用于極性化合物和生物大分子。

????（3）多電荷：APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子。ESI?能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。

????（4）電離程度：ESI?的軟電離程度較APCI?的還小，但其應用范圍較APCI?的大，只有少部分ESI?做不出，可以用APCI?輔助解決問題，但是APCI還是不能解決所有ESI?解決不了的問題。

液相色譜—質譜(GC—MS)聯(lián)用的熱噴霧方式的特點如下：

???(1)直接熱噴霧電離產生的樣品離子一般為質子化的離子或所加陽離子與樣品分子的合成離子，如(M十H)+，(M十NH4)+等。這種電離方式比化學電離溫和，譜圖往往有較強的準分子離子。因而更適用于難汽化和熱不穩(wěn)定樣品的分子；

???(2)能滿足一船液相色譜流量要求，****的水也能分析；

???(3)有良好的色譜分辨率，靈敏度等于或優(yōu)于傳送帶方式；

???(4)需加入電解質，操作麻煩，結構信息少，適合于四極質譜而不適合于磁質譜。以上兩種聯(lián)接裝置，雖然使液相色譜和質譜的聯(lián)用成為可能，但都有不足之處。

?

?

本文地址：