更換液相色譜柱該注意哪些問題？

色譜柱作為色譜儀分析系統中的分離單元，色譜柱的分離度對于色譜儀檢測分析速率的快慢以及檢測結果的準確性起著至關重要的作用。影響色譜柱分離度的因素有很多，除了色譜柱自身的性能參數外，在使用液相色譜儀色譜柱分析過程中，尤其要注意的是“柱外效應”對分析結果的影響。

那么，什么是“柱外效應”？“柱外效應”又是如何造成的呢？?所謂“柱外效應”是指除色譜柱自身性能之外造成色譜峰展寬的因素,其主要由進樣裝置、檢測器以及它們與色譜柱之間的連接管路死體積所造成。造成“柱外效應”的原因是樣品分子在液體流動相中的擴散系數比在氣體中小4~5個數量級，液體流動相的流速也比氣相慢1-2個數量級。因此，樣品進入色譜柱后，在柱子以外的任何死體積（進樣器、柱接頭、連接管、檢測器）中，樣品分子的擴散和滯留，都會引起色譜峰的展寬，而使柱效降低?。

????為使柱外效應減至最小，使檢測結果更加準確，液相色譜儀各裝備的管路連接非常重要。一般而言，液相色譜儀的**次安裝都是由色譜儀廠家技術員安裝完成的，整個液相色譜儀及其配套裝備都是安裝的很**的。客戶后期在更換色譜柱要注意的問題是接頭的處理，一般柱子入口和出口接頭為不銹鋼卡套接頭，當完成**次安裝后，不銹鋼卡套已固定死，因此，早更換色譜柱時應當注意的問題是柱子接頭處的形狀和長度，否則會產生一個非常大的死體積。

????更換色譜柱的操作方法是先用95%乙腈+5%水沖洗舊柱子（沖去柱子中殘留的緩沖鹽和之前難以洗脫的組分），關掉流速，待流速降至0后，把柱子兩邊的PEAK頭擰下來，用配套的塞子將換下的柱子兩頭堵上，密封保存。更換新的色譜柱時，應先將需換上的柱子兩邊的塞子旋開，確定好柱子標示的方向后，先接柱子入口端，并使柱子出口端略高于入口端，這樣就使流動相流過柱子時能將其中的氣泡排出，待氣泡排盡后，再接上柱子的出口端，用純的乙腈小流速沖洗半小時，再用流動相按0.2，?0.5，?1.0逐漸加大流速來沖洗。

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