在液相色譜儀分析中該如何處理流動相?
液相色譜儀是色譜檢測法的一個重要分支,與氣相色譜儀相比,液相色譜儀主要用于高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物樣品的檢測分析。液相色譜儀是以液體為流動相,貫穿在整個色譜流路系統中,對于流動相的要求是除了不能與樣品發生反應外,還應該是純凈無雜質的,常用的流動相有甲醇、乙腈水溶液。
為了使檢測結果更加準確,在進行液相色譜儀分析樣品之前,須對流動相進行預處理。流動相預處理方法主要分為兩步:過濾和脫氣。以甲醇作為流動相為例,具體操作方法如下。
流動相過濾的目的是去除甲醇溶液中的雜質。由于液相色譜儀的的所有部件都是相當精密的,無論是對于檢測樣品還是流動相的純度要求都高達99.99%,而不管是直接購買或是自己配置的溶劑都是無法達到這樣的純度,因此,在進行試驗之前必須對甲醇進行過濾除雜,以防甲醇溶劑中的雜質堵塞液相色譜儀的精密器件。
過濾甲醇的設備我們選用溶劑過濾器,溶劑過濾器由過濾杯、中間燒結濾頭、接收瓶、鋁合金夾子四部分構成,具體操作方法如下:
1.將接收瓶放在水平桌面上,中間燒結濾頭從瓶口插入,取一張有機濾膜放在濾頭正上方,再將過濾杯覆蓋住有機濾膜,與濾頭對齊放好后,使用夾子固定好;
2.使用真空泵連接管將真空泵與溶劑過濾器連接好(由于有機濾膜的孔徑很小,此處真空泵的作用是加快過濾的速率);
3.使用燒杯取適量甲醇溶液,倒入少量溶劑到溶劑過濾器的過濾杯中,檢查中間燒結濾頭處是否漏液;
4.打開真空泵,直至過濾杯中的甲醇溶劑完全過去完成;
5.甲醇過濾完成后,拆開裝置,取出有機過濾膜清洗掉表層上的雜質,再進行二次過濾即可。
流動相脫氣的目的是去除溶劑中的氣泡,是必不可少的步驟,因為流動相中的氣泡進入到液相色譜儀分析系統中,會影響系統的穩定性,流動相中的氣泡對液相色譜儀的影響有兩個方面:??氣泡隨溶劑進入系統中,會使泵頭出現空轉打滑現象;??氣泡進入檢測器中,經紫外照射,響應值不同,從而使基線不穩。
我們主要采用超聲波清洗器去除流動相溶劑中的氣泡,超聲清洗器的操作簡單快捷。只要將過濾后的溶劑放入盛有1/2~2/3體積水的超聲清洗器中震蕩半個小時即可。
在處理液相色譜儀流動相的過程中要注意溶劑的二次感染,因此,要尤其注意使用容器和設備的清潔度,以及要注意流動相溶劑的密封保存。
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